При заболеваниях, вызванных вирусными инфекциями, для уточнения типов вирусов, подлежащих лечению, могут быть выполнены следующие два типа обследований:
1. Прямое обнаружение самого вируса
2. Он может обнаруживать антиген на поверхности вируса и нуклеиновую кислоту вируса.
Тест выявил антитела, вырабатываемые для противодействия вирусу:
В нормальных условиях тестирование на антиген не требует строгих лабораторных условий и в основном подходит для крупномасштабного скрининга в больницах первичного звена; Тестирование на антитела простое в эксплуатации, а результаты теста можно получить за 10-15 минут. Для обнаружения нуклеиновых кислот требуются многие лабораторные условия, временный персонал и оборудование, но страница результатов является наиболее чувствительной и точной.
Из 10 новых реагентов для обнаружения нуклеиновых кислот коронавируса, которые были одобрены, 8 из них используют метод флуоресцентной ПЦР, а остальные методы обнаружения - это комбинированный метод секвенирования с привязкой к зонду и метод микросхемы амплификации с постоянной температурой.
1. Метод флуоресцентной ПЦР.
Метод ПЦР относится к полимеразной цепной реакции, которая может значительно увеличить следовые количества ДНК. При использовании для обнаружения нового коронавируса, поскольку новый коронавирус представляет собой РНК-вирус, перед выполнением ПЦР-обнаружения необходимо выполнить обратную транскрипцию вирусной РНК в ДНК.
Принцип обнаружения флуоресцентной ПЦР заключается в том, что по мере проведения ПЦР продукты реакции продолжают накапливаться, и интенсивность сигнала флуоресценции также пропорционально увеличивается. Наконец, изменение количества продукта отслеживают по изменению интенсивности флуоресценции, тем самым получая кривую усиления флуоресценции.
В настоящее время это наиболее часто используемый метод обнаружения нуклеиновых кислот нового коронавируса. Однако следующие факторы могут вызвать ошибки в результатах теста:
Неправильное хранение или отказ от отправки на тестирование: РНК-вирусы легко разрушаются. Поэтому после получения образцов от пациентов их необходимо хранить в стандартизированном порядке и как можно скорее протестировать. В противном случае результат теста может быть неточным.
Ошибка интерпретации результатов: одобренные в настоящее время тестовые продукты выбираются на основе открытой рамки считывания 1a / b, белка оболочки и белка нуклеокапсида нового генома коронавируса. Однако праймеры для обнаружения и конструкции зондов для разных продуктов различаются, и существуют различия в обнаружении и интерпретации сегментов с одной мишенью, сегментов с двумя мишенями и сегментов с тремя мишенями. Следовательно, если интерпретация не выполняется строго в соответствии с различными инструкциями, это может привести к неправильной оценке результата.
2. Комбинированный метод секвенирования полимеризации с привязкой к зонду.
Это обнаружение в основном заключается в использовании специального инструмента для обнаружения последовательности гена, переносимой наносферами ДНК на слайде для секвенирования.
Этот вид обнаружения имеет высокую чувствительность, и его нелегко пропустить диагностику, но на результаты также легко влияют многие факторы, в том числе:
Образцы, не проверенные вовремя: как и в случае метода флуоресцентной ПЦР, результаты могут быть неточными, если они не хранятся стандартизированным образом и не проверяются как можно скорее.
Слишком высокая комнатная температура тестового участка: это также повлияет на точность результатов теста. Различные инструменты и наборы для тестирования также могут повлиять на результаты.
3. Метод микросхемы с постоянным температурным усилением.
Обнаружение генных чипов - один из традиционных методов вирусологической диагностики. Принцип обнаружения - это метод обнаружения, разработанный на основе дополнительных характеристик связывания нуклеиновых кислот, который можно использовать для качественного или количественного измерения нуклеиновых кислот, присутствующих в организмах. По сравнению с ПЦР генный чип имеет более высокую точность и более короткое время, но он также более дорогой и пропускная способность обнаружения (объем данных, который может быть сгенерирован за единицу времени) относительно ниже.
Утвержденный на этот раз чип термостата может обнаруживать шесть типов респираторных вирусов, включая новый коронавирус. Результат можно получить в течение 1,5 часов,
По сравнению с ПЦР генный чип имеет более высокую точность и более короткое время, но цена выше, а пропускная способность обнаружения (объем данных, который может быть сгенерирован за единицу времени) относительно ниже.
4. Обнаружение вирусных антител
Реагенты для обнаружения антител используются для обнаружения антител IgM или IgG, вырабатываемых организмом человека после того, как вирус попадает в организм человека. Антитела IgM появляются раньше, а антитела IgG - позже.
В настоящее время пять новых реагентов для обнаружения антител к коронавирусу, которые были одобрены, используют метод коллоидного золота и метод хемилюминесценции магнитных частиц.
5. Метод коллоидного золота.
В методе коллоидного золота для тестирования используется тестовая бумага с коллоидным золотом, которая в настоящее время часто используется для быстрого тестирования.
Этот вид тестовой бумаги имеет специальную маркировку и имеет отверстия, которые используются для капания образца сыворотки испытуемого. На тестовой бумаге коллоидного золота есть две линии, одна называется тестовой линией, а другая - линией контроля качества. Если обе линии окрашены, это означает положительный результат; окрашена только линия контроля качества, что означает отрицательный результат; за исключением этих двух случаев, это относится к Недействительному результату.
