Способы избежать загрязнения клеток: советы по пипетированию, которые необходимо знать
Среди многих переменных, которые контролируются в клеточной культуре, одна конкретная переменная влияет на весь эксперимент: загрязнение. Один фактор, способствующий клеточному загрязнению, не всегда находится в поле зрения, и хотя он может незаметно повлиять на здоровье клеток и повлиять на результаты измерений, это загрязнение пипетирования.
При планировании экспериментов выбору пипеток, наконечников и программ дозирования уделяется мало внимания. Даже поверхностный раствор (автоклавирование) для предотвращения загрязнения пипетки может оказаться не таким эффективным, как это принято считать.
Первое правило клеточной культуры: избегать загрязнения. Почему стерильная техника так важна для успешного культивирования клеток?
Асептическая техника — единственный способ получить надежные и воспроизводимые результаты. Загрязнение может повлиять на рост клеток, обмен веществ и здоровье --, что интересует ученых. Загрязненные клеточные линии не обладают желаемыми свойствами и каждый раз функционируют по-разному, в зависимости от серьезности загрязнения. Кроме того, если загрязняющие вещества перерастают интересующие вас клетки, вы можете в конечном итоге изучить не тот организм.
С какими типами загрязнителей чаще всего сталкиваются ученые?
Распространенными источниками загрязнения являются бактерии, дрожжи и плесень. В работе с клеточными культурами труднее всего обнаружить и уничтожить микоплазму. Менее распространенные типы загрязнения включают, например, выщелачивание пластика в лабораторных расходных материалах.
Каковы общие причины загрязнения клеток?
Распространенным источником загрязнения является плохое пипетирование, например, использование загрязненных пипеток и наконечников без фильтров. Кроме того, проблемой является отсутствие надлежащей лабораторной практики, например неадекватная дезинфекция инструментов, таких как инкубаторы или ламинарные боксы. Для удаления микоплазмы требуется фильтрация с использованием фильтра 0,1 мкм вместо фильтра 0,2 мкм.
Три загрязнения при пипетировании:
1. Загрязнение пипетки-образца: пипетка или наконечник пипетки загрязняют образец.
Как избежать:
Используйте стерильные наконечники с фильтром, чтобы предотвратить загрязнение корпуса пипетки.
Меняйте наконечник пипетки после каждого образца.
Регулярно автоклавируйте или стерилизуйте пипетки этанолом. Выберите пипетку, совместимую с автоклавированием.
2. Загрязнение от образца к пипетке. При попадании образца в корпус пипетки пипетка загрязняется.
Как избежать:
Используйте наконечники с фильтром или объемные наконечники, чтобы предотвратить попадание образцов в корпус пипетки.
При пипетировании держите пипетку в вертикальном положении. Храните пипетку в вертикальном положении.
Наклоняйте бутылку при пипетировании.
Медленно отпустите кнопку, чтобы образец не попал в пипетку. Выбирайте пипетку с функцией мягкого выброса.
3. Загрязнение между образцами: оставшиеся после пипетирования образцы переносятся на следующий образец. Обычно возникает, когда один и тот же наконечник используется несколько раз.
Как избежать:
Меняйте наконечник пипетки после каждого образца.
Используйте наконечники с фильтром или объемные наконечники, чтобы предотвратить попадание образца в корпус пипетки и на следующий образец.
Убедитесь, что наконечник пипетки плотно прилегает к пипетке, чтобы избежать утечки образца. Например, наконечник Yongyue Medical.
Существуют ли факторы загрязнения, о которых ученые могут даже не знать?
Эффективность автоклавирования часто не проверяется, и если автоклав не работает должным образом, наконечники пипеток после автоклавирования могут оказаться нестерильными. Предварительно стерилизованные фильтры, завернутые в защитную упаковку, являются самым безопасным вариантом предотвращения таких несчастных случаев. Процесс предварительной стерилизации высококачественных наконечников для пипеток регулярно проверяется для обеспечения эффективности предварительной стерилизации.
Как инструменты для пипетирования и дозирования облегчают ученым работу с образцами в стерильной среде?
Правильный выбор пипеток и наконечников для пипеток может упростить асептический рабочий процесс. Медицинские пипетки Yongyue легко чистить и открывать без инструментов, что ускоряет ежедневную очистку. Поскольку автоклавирование более эффективно удаляет загрязнения, чем салфетки с этанолом, механические пипетки Sartorius полностью автоклавируются, что означает, что вы можете надежно дезинфицировать свои пипетки. Мягкий выброс наконечника предотвращает потенциальный риск разбрызгивания загрязнения при выбросе наконечника. Предварительно стерилизованные наконечники с фильтром защищают ваши образцы от перекрестного загрязнения. Медицинские насадки Yongyue также упакованы в герметичную упаковку, что означает, что любые загрязнения в условиях хранения и доставки не соприкасаются с насадками или коробкой с наконечниками.
Как ученые могут избежать загрязнения? Каковы ваши главные советы по стерильной работе?
Во-первых, хорошая лабораторная практика и тщательное планирование рабочих этапов. Обязательно храните в ламинарном шкафу только то, что необходимо для конкретного рабочего процесса, и одновременно используйте одну клеточную культуру. Кроме того, регулярное тестирование на загрязняющие вещества, такие как микоплазма, дает вам душевное спокойствие и уверенность в ваших результатах. При работе в стерильных условиях деньги, потраченные на предварительно стерилизованные фильтрующие наконечники и стерильные реагенты, того стоят.
